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人源抗EV71病毒基因工程抗體的研究
孫麗娜; 張黎; 張福順; 李川; 張全福; 李德新; 梁米芳 中國(guó)疾病預(yù)防控制中心病毒病預(yù)防控制所; 傳染病預(yù)防控制國(guó)家重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室; 北京100052
- 腸道病毒屬
- 肽庫(kù)
- 免疫球蛋白類
- 輕鏈
- 重鏈
摘要：目的 研制人源抗EV71病毒基因工程抗體.方法 采集多個(gè)患兒外周血淋巴細(xì)胞,構(gòu)建人源抗EV71單鏈（scFv）噬菌體抗體基因文庫(kù).用純化的EV71 VPI蛋白對(duì)抗體庫(kù)進(jìn)行篩選,將篩出抗體的輕鏈和重鏈通過(guò)序列測(cè)定確定抗體輕重鏈型別后分別克隆入全抗體表達(dá)載體pAC-LCH3R后轉(zhuǎn)染昆蟲Sf9細(xì)胞,利用桿狀病毒/昆蟲細(xì)胞系統(tǒng)實(shí)現(xiàn)全抗體的分泌型表達(dá).結(jié)果 成功地獲得了1株抗EV71病毒VPI蛋白的人源單克隆抗體,利用ELISA、IFA對(duì)所獲人源單克隆抗體的功能特性進(jìn)行鑒定,表達(dá)成分泌型IgG全抗體在體外與A型及C4亞型EV71病毒的中和反應(yīng)結(jié)果 顯示為陰性.結(jié)論 從免疫庫(kù)中獲得了1株人源非中和單抗,為EV71病毒引起的手足口病的鑒別診斷奠定了基礎(chǔ).
- 腸道病毒屬
- 肽庫(kù)
- 免疫球蛋白類
- 輕鏈
- 重鏈
摘要：目的 研制人源抗EV71病毒基因工程抗體.方法 采集多個(gè)患兒外周血淋巴細(xì)胞,構(gòu)建人源抗EV71單鏈（scFv）噬菌體抗體基因文庫(kù).用純化的EV71 VPI蛋白對(duì)抗體庫(kù)進(jìn)行篩選,將篩出抗體的輕鏈和重鏈通過(guò)序列測(cè)定確定抗體輕重鏈型別后分別克隆入全抗體表達(dá)載體pAC-LCH3R后轉(zhuǎn)染昆蟲Sf9細(xì)胞,利用桿狀病毒/昆蟲細(xì)胞系統(tǒng)實(shí)現(xiàn)全抗體的分泌型表達(dá).結(jié)果 成功地獲得了1株抗EV71病毒VPI蛋白的人源單克隆抗體,利用ELISA、IFA對(duì)所獲人源單克隆抗體的功能特性進(jìn)行鑒定,表達(dá)成分泌型IgG全抗體在體外與A型及C4亞型EV71病毒的中和反應(yīng)結(jié)果 顯示為陰性.結(jié)論 從免疫庫(kù)中獲得了1株人源非中和單抗,為EV71病毒引起的手足口病的鑒別診斷奠定了基礎(chǔ).
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中華實(shí)驗(yàn)和臨床病毒學(xué)
- 預(yù)計(jì)1-3個(gè)月 預(yù)計(jì)審稿周期
- 0.72 影響因子
- 醫(yī)學(xué) 快捷分類
- 雙月刊 出版周期
主管單位：中國(guó)科學(xué)技術(shù)協(xié)會(huì);主辦單位：中華醫(yī)學(xué)會(huì)
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