摘要：采用生物酶催化法替代化學合成法制備左旋多巴是一條綠色、經濟的合成路線。將來源于弗氏檸檬酸菌酪氨酸酚裂解酶的編碼基因與pKK223-3載體連接,構建表達載體pKK223-TPL,并在大腸桿菌BL21(DE3)中成功表達,構建了高活性的基因工程菌;研究了影響酪氨酸酚裂解酶酶活力和穩定性的關鍵因素,探索了減少副產物生成、提高底物轉化率的催化條件。結果表明:在pH7.5、20℃條件下,控制鄰苯二酚質量濃度不超過12g/L、丙酮酸鈉質量濃度不超過7.5g/L、以0.4mol/L乙酸銨為氨來源、0.1mmol/LK+為激活劑時,可有效減少副產物的生成,提高酪氨酸酚裂解酶的穩定性,經過12h反應,左旋多巴產量達到122.8g/L,鄰苯二酚的最大轉化率達到98.7%,具有較好的工業化應用潛力。