摘要：為挖掘越橘低溫脅迫響應(yīng)基因在低溫逆境脅迫應(yīng)答中的作用,探討越橘低溫逆境脅迫響應(yīng)機(jī)制,以北陸越橘為試材,克隆低溫響應(yīng)基因 VcICE1 (Inducer of CBF3 expression 1),分析其表達(dá)模式及對低溫的響應(yīng),探討 VcICE1 在抵御低溫脅迫中的生物學(xué)功能。利用農(nóng)桿菌介導(dǎo)法獲得轉(zhuǎn)基因擬南芥,比較轉(zhuǎn)基因和野生型擬南芥對低溫脅迫響應(yīng)的差異。利用瞬時轉(zhuǎn)化煙草葉片試驗,分析VcICE1對 AtCBF3 的轉(zhuǎn)錄調(diào)控。結(jié)果表明,克隆獲得越橘低溫響應(yīng)因子 VcICE1 ,該基因ORF為1 566 bp,編碼含有522個氨基酸的蛋白質(zhì),含有1個保守的bHLH結(jié)構(gòu)域。系統(tǒng)進(jìn)化分析表明,VcICE1與AtICE1同源性最高。表達(dá)分析顯示, VcICE1 在根、枝條、幼葉、花和果實中均表達(dá),在幼葉中表達(dá)量最高,在果實中最低,并響應(yīng)低溫處理。在擬南芥中異位表達(dá) VcICE1 ,其低溫抗性較野生型顯著升高。瞬時表達(dá)試驗結(jié)果表明,VcICE1可激活 AtCBF3 的表達(dá)。 VcICE1 能夠?qū)Φ蜏靥幚碛忻黠@響應(yīng),推測其在響應(yīng)低溫脅迫過程中發(fā)揮重要的調(diào)控作用。